机械生长因子对骨骼肌卫星细胞增殖及MGF mRNA表达的影响

摘要：

【摘要】目的骨骼肌卫星细胞是肌源性干细胞,该细胞的增殖受一系列生长因子的影响。而机械生长因子(mechano growth factor,MGF)是近年来发现的一种对力学信号敏感的自分泌局部生长因子,可以激活肌卫星细胞的增殖。本研究采用不同浓度的MGF干预体外培养的骨骼肌卫星细胞,探讨促进卫星细胞增殖的适宜浓度。方法用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,待细胞同步化后,分别应用不同浓度的MGF(0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml和150ng/ml)干预原代培养的骨骼肌卫星细胞96小时,采用RT-PCR技术检测肌卫星细胞MGF mRNA的表达,用CCK-8检测卫星细胞的增殖情况,并检测细胞总蛋白含量。结果与0ng/ml MGF组相比,25ng/ml和50ng/ml组OD值在各时间点均显著性增加,其中25ng/ml组在24h至96h内OD值具有高度显著性(P<0.01),50ng/ml组在24h至72h内也有高度显著性的增加(P<0.01);25ng/ml和50ng/ml组MGF mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.05),其它组的表达与对照组无显著性差异。总蛋白含量也显示,与0ng/ml MGF组相比,25ng/ml和50ng/ml组均有显著性升高(P<0.05)。结论适宜浓度的MGF具有促进肌卫星细胞增殖的作用,其中浓度为25ng/ml和50ng/ml时具有较强的促增殖作用,但有一定的时间差异。
【关键词】骨骼肌卫星细胞；机械生长因子；细胞原代培养；细胞增殖；

引言：

【引言】骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells）位于肌膜（plasmalemma）和基底膜（basal lamina）之间，通常处于静息状态，是具有增殖和分化潜力的生肌干细胞。骨骼肌对运动训练、应力负荷的适应性及损伤后的修复很大程度上依赖于骨骼肌卫星细胞的增殖，卫星细胞被激活后，持续增殖、分化，并最终与损伤的肌纤维融合或在损伤部位生成新的肌纤维。但目前卫星细胞激活的机制并不是很清楚， Allen 等认为这可能是因为运动训练造成了骨骼肌的损伤，从而启动了肌细胞的再生过程。骨骼肌损伤后引起炎症反应，如中性粒细胞核和巨噬细胞，浸入损伤部位，炎症细胞或损伤的肌组织会释放细胞因子，如HGF、IGF 等调节肌卫星细胞的增殖和分化。在众多的研究中，普遍认为IGF－1 在骨骼肌的肥大过程中发挥重要的调节作用， IGF－1 可以促进离体培养的骨骼肌卫星细胞的增殖和分化， Charge 等在在体的动物模型中也证实了以上结论。

作者：

史仍飞；刘子青

作者单位：

上海体育学院运动科学学院；上海市杨浦区中心医院康复医学科；