猪圆环病毒2型毒株分离鉴定和体外增殖特性研究

摘要：

【摘要】为分离鉴定猪圆环病毒2型(PCV2)毒株并研究其体外增殖特性,本研究采用PCR法分别对从山东、山西、北京和河北收集的疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病猪的病料进行检测,将检测结果为PCV2阳性的病料处理后接种PCV阴性的PK15A细胞连续传代进行病毒分离,观察每代细胞是否有病变,采用PCR、间接免疫荧光法(IFA)对第3代培养物进行鉴定,对各毒株的全基因组进行克隆、测序和系统进化分析,并将PCV2各分离株连续传20代,对其体外增殖特性进行了研究。结果共分离到5株猪圆环病毒2型毒株,分别命名为DBN-SD02、DBN-SX07DBN-BJ08、DBN-HB12和DBN-HB13株,GenBank登录号分别为FJ660967、FJ660968、FJ660969、FJ660970和FJ660971。各分离株基因组全长均为1767bp,系统进化分析结果表明,除DBN BJ-08属于PCV2a基因型外,其余均属于PCV2b基因型,基因组序列核苷酸同源性为98.5%～99.7%,体外增殖特性研究结果表明,随着传代次数的增加病毒感染滴度均有明显的提高。
【关键词】猪圆环病毒2型；分离；鉴定；增殖特性；

引言：

【引言】由猪圆环病毒２型（ＰＣＶ２）引起的断奶仔猪多系统衰竭综合征（ＰＭＷＳ）自２０世纪９０年代初被鉴定以来，已给世界养猪业的造成了严重危害。研究结果表明，ＰＣＶ２感染除了造成ＰＭＷＳ，同时还与猪呼吸道综合症（ＰＲＤＣ）、猪皮炎和肾病综合征（ＰＮＤＳ）、先天性震颤、繁殖障碍、胎儿心肌炎和扩张性坏死性肺炎等猪圆环病毒病（ＰＣＶＡＤ）密切相关（Ｃｈａｅ，２００５），已成为影响世界养猪业的最重要的病毒性传染病。ＰＣＶ２属于圆环病毒科圆环病毒属，病毒粒子直径为１７ｎｍ，呈二十面体对称、无囊膜，基因组为单股环状负链ＤＮＡ，是目前发现的最小的动物病毒。

作者：

王贵华；陈义锋；汤波

作者单位：

北京大北农动物医学研究中心；