猪瘟病毒E2基因主要抗原区的克隆及其原核表达

【引言】猪瘟是猪的一种流行广、高度接触性的烈性传染病，其病原体猪瘟病毒( CSFV) 是黄病毒科瘟病毒属中的成员，为有囊膜的单股正链RNA 病毒。E2 蛋白是猪瘟病毒的跨膜结构蛋白，是诱导被感染动物机体产生免疫保护与CSFV 中和抗体的主要病毒结构蛋白，大约由373 个氨基酸残基组成。C 端一侧含有1 个约由18 个氨基酸组成的疏水侧链，可形成跨膜结构蛋白( TMP) 。不同毒株的E2 蛋白糖基化程度不同，分子质量亦随之不同，一般在51 ～55 ku 范围内变动，因此也被称为gp55 蛋白。E2 蛋白能够诱导动物机体产生高效价的中和抗体，其抗原结构域主要集中在蛋白分子的N 端区域( 690 ～866 aa) ，可以分为A、B、C、D 4 个独立的抗原结构域。A 包括A1、A2、A3 共3 个亚抗原结构域。连接A 和D 这2 个抗原结构域的是一个链内疏水序列，该序列在瘟病毒中保守，推测这部分序列可能参与病毒与细胞膜的融合过程。B、C 抗原结构域可能参与同宿主细胞受体的相互作用。为进一步研究猪瘟病毒E2 蛋白分子在免疫中的作用机理，建立快速、准确诊断猪瘟的方法，试验克隆了含有E2 蛋白主要抗原区域的cDNA 片段，并与已登录的猪瘟病毒疫苗株相应序列进行比较，成功构建了原核表达重组质粒pET 32a － zE2，并在E． coli 中得到了表达，现报道如下。