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黄河裸裂尻生长激素(GH)基因的PCR扩增和克隆

黑龙江畜牧兽医
Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicin
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摘要:
【摘要】 为了克隆黄河裸裂尻生长激素(GH)基因并获得表达产物,试验采用异硫氰酸胍法提取黄河裸裂尻脑组织总RNA,以分离的RNA为模板,采用RT-PCR扩增获得GH基因cDNA,将cDNA插入质粒pQE30中,并在大肠杆菌RB791中表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达情况。结果表明:扩增后黄河裸裂尻GH基因长度为508 bp,黄河裸裂尻GH基因与青海湖裸鲤的同源性很高,电泳显示出1条新的分子质量约为14.4 ku的特异性条带。
【关键词】 黄河裸裂尻; 生长激素(GH)基因; 克隆; 基因表达;
引言:

【引言】生长激素( growth hormone,GH) 是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种单一肽链的蛋白激素,是一种具有广泛生理功能的生长调节素。鱼类生长激素( fish growth hormone, fGH) 是由鱼类脑垂体合成和分泌的一种分子质量约为22 ku 的蛋白多肽,对鱼类的生长和发育具有重要作用。试验采用RT - PCR 方法克隆黄河裸裂尻( Schizopygopsis pylzoui) GH 基因cDNA,以进一步获得黄河裸裂尻GH 基因序列,并将其连接到载体上,构建黄河裸裂尻GH 基因表达质粒并在大肠杆菌中表达,获得融合蛋白,现报道如下。

作者:
谢保胜;李耀鹏;姚军卓;陈兴花
作者单位:
青海大学生物科学系;

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