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黄鳝血清白蛋白的纯化及抗体制备

水产养殖
Journal of Aquaculture
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摘要:
【摘要】 通过阴离子交换层析和凝胶过滤层析,从黄鳝血清中得到其血清白蛋白,命名为MAA-serum,分子量为67kDa,为单链非糖蛋白,其N末端氨基酸序列为GHKKW。用0.5mg/只MAA-serum作为免疫源免疫大白兔,经3次免疫后,抽取大白兔血液,分离血清,饱和硫酸氨沉淀,获得抗MAA-serum的多克隆抗体。经ELISA方法测定该抗体与黄鳝血清白蛋白的免疫反应,抗体滴度为1∶100000。经初步研究发现黄鳝皮肤中也有大量血清白蛋白分布,该抗体为进一步研究MAA-serum在皮肤中的分布及生物学功能打下基础。
【关键词】 黄鳝; 血清白蛋白; 分离纯化; 抗体;
引言:

【引言】血清白蛋白合成于肝脏,是脊椎动物血浆中含量最丰富的蛋白质,约占血浆总蛋白的一半。血清白蛋白的生理功能十分重要,主要为结合及运输多种内源及外源性组分,如脂肪酸、胆色素、氨基酸、类固醇激素、金属离子和许多治疗分子等;另外还参与维持血浆胶体渗透压及物质交换,清除体内自由基,抗凝血作用,影响微血管渗透性等。目前,已从几种两栖动物血清及皮肤中分离得到白蛋白,如非洲爪蟾(Xenopus laevis)68 kDa 及73 kDa 血清白蛋白,大蹼铃蟾(Bombina maxima)及黑眶蟾蜍(Duttaphrynus melanostictus)皮肤及血清白蛋白等。为研究黄鳝血清白蛋白的功能,实验对黄鳝血清白蛋白进行了分离纯化。在黄鳝皮肤中也发现有血清白蛋白类似物存在,为进一步研究其在皮肤中的分布及功能,利用纯化的黄鳝血清白蛋白为免疫源,免疫大白兔,获得了抗黄鳝血清白蛋白的多克隆抗血清,该血清能与黄鳝血清白蛋白发生免疫反应。抗体的获得为进一步研究黄鳝血清白蛋白在皮肤中的分布打下基础。

作者:
张英霞;陆露;陈聪伟;迟婷婷
作者单位:
海南大学热带生物资源教育部重点实验室; 海南大学海洋生物教学示范中心; 海口VTI生物研究院;

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