双拷贝抑制素基因免疫对大鼠卵泡发育、产仔及生殖激素的影响

【引言】抑制素的主要作用是抑制促卵泡素（Ｆｏｌｌｉｃｌｅｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｈｏｒｍｏｎｅ，ＦＳＨ）分泌。抑制素免疫能通过中和内源性抑制素增加单胎动物和多胎动物分泌ＦＳＨ 的能力，促进卵泡发育。研究表明，抑制素基因疫苗制备简单，构建成本低，纯度高，用抑制素基因免疫动物可引起宿主产生相应的特异性免疫应答。因此，抑制素基因免疫技术在提高动物繁殖功能上具有一定的优越性。用已构建的抑制素原核表达质粒ｐｃＩＮＨ 免疫大鼠能产生抗抑制素抗体。在免疫佐剂辅佐下，单拷贝抑制素基因ｐｃＩＳ免疫可诱导大鼠、绵羊、黄牛等产生抗抑制素抗体，促进卵泡发育。随后，曹少先等扩增了ｐｃＩＳ质粒的抑制素基因片段，将带有ＢａｍＨⅠ酶切位点的目的片段插入ＨＢｓＡｇ－Ｓ（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｇｅｎｅ）区第１１２～１１３氨基酸密码子之间，构建了含２个拷贝抑制素（Ｉｎｈｉｂｉｎ，ＩＮＨ）片段的基因疫苗ｐｃＩＳＩ，并证实了双拷贝抑制素ｐｃＩＳＩ质粒的免疫源性比单拷贝抑制素ｐｃＩＳ更强［。相关研究表明，在免疫佐剂协助下，双拷贝抑制素ｐｃＩＳＩ能促进小鼠、黄牛产生抗体，增强动物的繁殖性能。前期研究也表明，在不使用佐剂的情况下，双拷贝抑制素基因ｐｃＩＳＩ免疫不仅可以增加黄牛成熟卵泡大小，还能促进妊娠黄体发育。那么，在不使用免疫佐剂时双拷贝抑制素ｐｃＩＳＩ基因免疫是否可影响大鼠成熟卵泡数、产仔和生殖激素分泌呢？目前尚无这方面的报道。在不使用免疫佐剂的情况下，本研究分别用１０、５０、１００μｇ·１００μＬ－１双拷贝抑制素ｐｃＩＳＩ基因免疫大鼠，探讨了ｐｃＩＳＩ对大鼠卵泡发育、产仔和生殖激素的影响，分析了抑制素基因免疫大鼠的抗体水平与卵巢发育和产仔的关系，以深入了解卵泡抑制素基因免疫的作用机制，为建立提高动物繁殖力的新技术奠定基础。