牛朊蛋白和酵母朊毒体结构域融合蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

【引言】牛海绵状脑病（Ｂｏｖｉｎｅ　ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ　ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，ＢＳＥ）是牛的一种渐进性、致死性的中枢神经系统疾病。该病属于传播性海绵状脑病（Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅ　ｓｐｏｎｇｉｆｏｒｍ　ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｉｅｓ，ＴＳＥ），又称朊毒体病（Ｐｒｉｏｎ　ｄｉｓｅａｓｅｓ），其病因目前认为是由宿主的一种细胞型朊蛋白（Ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｉｓｏｆｏｒｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ，ＰｒＰｃ）构象发生改变形成致病型朊蛋白（Ｄｉｓｅａｓｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｉｓｏｆｏｒｍ　ｏｆ　ＰｒＰ，ＰｒＰｓｃ）所致。制备抗朊蛋白（Ｐｒｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＰｒＰ）的特异性抗体，并在此基础上建立准确、灵敏、快速检测ＰｒＰＳｃ的方法一直是朊毒体诊断研究的热点。同时，由于ＰｒＰ在所有哺乳动物细胞中都表达，且氨基酸同源性高达９０％以上，所以抗ＰｒＰ抗体的制备受免疫耐受的制约。国外已有多种商品化的牛ＰｒＰ单克隆抗体，但价格昂贵，我们急需具有自主知识产权的疯牛病诊断技术，尤其是国产牛ＰｒＰ单克隆抗体，以用于ＢＳＥ的诊断。