不同生理时期梅花鹿血液GSH-Px含量测定及其纯化

摘要：

【摘要】研究不同生理时期梅花鹿全血中GSH-Px含量变化及其纯化技术,为开发鹿血抗衰老资源奠定理论基础。用DINB法测定梅花鹿的溶血液、血细胞内容物、血浆和血细胞细胞膜中GSH-Px含量并计算全血GSH-Px含量;利用10%～100%饱和度的(NH4)2SO4盐析和柱层析技术纯化GSH-Px;用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其亚基相对分子质量。试验结果表明:全血GSH-Px含量以生茸期最高为(1 973.07±25.43)U.mL-1,与配种期的(1 727.74±12.46)U.mL-1差异极显著(P<0.01),与生茸前期的(1 961.83±16.54)U.mL-1差异不显著(P>0.05);GSH-Px的初始比活力为24.9U.mg-1,经纯化后得到GSH-Px 0.37mg.mL-1,最终比活力1 347.7U.mg-1,纯化倍数为54.1倍,回收率25.00%;鹿血GSH-Px亚基的相对分子质量为17.2ku。结果提示生茸期鹿血的GSH-Px含量最高,开发利用价值最大,GSH-Px含量与生理特性相关;鹿血GSH-Px盐析条件为40%～80%饱和度的(NH4)2SO4,此时所得GSH-Px纯化倍数较高。
【关键词】梅花鹿；血液；谷胱甘肽过氧化物酶；纯化；

引言：

【引言】鹿血，为鹿科动物梅花鹿（Ｃｅｒｒｕｓ　ｎｉｐｐｅｎ　Ｔｅｍｍｉｎｃｋ）或马鹿（Ｃｅｌａｏｈｕｓ　Ｌ）的膛血或茸血，自古就有记载其具有延缓衰老和抗疲劳等功效，而衰老与抗衰老是现代医学界的研究热点之一。为此，近年来，人们对鹿血抗衰老机制和鹿血抗衰老产品开发进行了初步研究。蒋蕾等研究证明鹿血中含有超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ）等多种抗衰老酶类。崔丽等和宋高臣等分别采用给大鼠口服鹿血清和鹿血口服液的方法，证明鹿血能降低大鼠血清及肝、脑组织中ＬＰＯ的含量，增强抗衰老能力。张启迪等和曹荣峰等分别对梅花鹿血液中卵磷脂含量的测定方法和不同饲养时期鹿血中抗衰老物质（卵磷脂、次黄嘌呤和尿嘧啶）的含量进行了研究，结果表明卵磷脂含量以生茸期最高，次黄嘌呤和尿嘧啶含量以配种期最高。

作者：

张光超；王晓松；马泽芳；

作者单位：

青岛农业大学；新疆库尔勒万通鹿业科技有限责任公司；