靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究

摘要：

【摘要】为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。
【关键词】 shRNA；转基因克隆猪；体细胞；抗病毒活性；
【基金】国家转基因重大专项(2009ZX08006-003B)

引言：

【引言】口蹄疫(Foot-and-mouth disease，FMD)是由FMD病毒(FMDV)引起的牛、羊、猪等偶蹄类动物的一种急性、热性、高度接触传染性动物疫病。该病传播速度快，宿主范围广，传播途径多，发病率高，对偶蹄类动物的危害严重。OIE 将其列为必须实时通报动物疫病之一；我国将其列为一类动物传染病。国内主要采用灭活疫苗免疫和扑杀相结合的防控措施，但该病仍然时有发生。因此，采取更有效的措施控制FMD 疫情的发生和蔓延，已成为目前亟待研究的重要课题。

作者：

蔡扩军；马铈委；乔军

作者单位：

石河子大学动物科技学院；新疆畜牧科学院兽医研究所；