鸭坦布苏病毒NS1基因的克隆及原核表达

摘要：

【摘要】为原核表达鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)NS1重组蛋白,本研究通过RT-PCR方法扩增NS1基因,将其亚克隆至pET32a(+)载体中构建重组表达质粒pET32a-NS1。将其转化大肠杆菌Rosetta中,经IPTG诱导表达了约59 ku的重组蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白可以与DTMUV阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。
【关键词】鸭坦布苏病毒； NS1基因；克隆与表达；
【基金】公益性行业(农业)科研专项(201003012);广东省科技厅项目(2008B020700001);广东省农业厅项目([2010]540)

引言：

【引言】鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus，DTMUV)属于黄病毒科黄病毒属的坦布苏病毒，是DTMUV 病的病原。DTMUV 病于2010 年在华东地区首次发生，已蔓延至全国各地的养禽场。该病毒能够感染鸭、鹅和鸡，蛋鸭发病后，临床上以病鸭厌食、排稀便、产蛋量急剧下降甚至停止，卵泡出血，变性，坏死为主要特征，其发病率高达100 %，死亡率为5 %～10 %，开展该病深入的流行病学研究具有重要的经济和公共卫生意义。目前，适用于该病大规模血清流行病学研究的方法只有用纯化的全病毒抗原建立的间接ELISA 方法，但由于该方法采用全病毒抗原，具有潜在散毒的危险，同时成本高。因此，迫切需要建立一种更加安全、成本低廉的流行病学监测方法。

作者：

郭建伟；董嘉文；孙敏华；李林林

作者单位：

华南农业大学兽医学院；广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室；